İtalyan Donanmasının F-35B'leri 2600 uçuş saatine ulaştı. F-35B, Harrier uçaklarıyla karşılaştırıldığında gizlilik, hız ve ağ merkezli savaş avantajları sunmaktadır.
ABD ve İngiltere de LHA gemileri ve uçak gemileri için Harrier STOVL uçaklarını F-35B ile değiştirmiştir. F-35 ailesinin STOVL varyantı olan F-35B, LHD'lerden, LHA'lardan ve katapult olmayan uçak gemilerinden kısa kalkış için motoru ve üç kaldırma fanı (biri kokpitin arkasında, diğeri kanat köklerine doğru yönlendiren) için aşağı doğru itme vektörüne sahiptir.
Uçak, motor nozulunu tamamen aşağı eğerek dikey olarak iniş yapar. Kaldırma fanlarının varlığı nedeniyle, F-35B sadece GAU-22 Gatling silahını gövde altı silah podu ile kullanabilir. Farklılıkların yanı sıra, F-35B, ortak aviyonik ve silahlara sahip olan F-35A ve F-35C varyantlarına çok benzer şekilde çalışır.